治疗白癜风医院哪家好 https://jbk.39.net/yiyuanzaixian/bjzkbdfyy/为了在具有免疫能力的宿主中顺利生长，肿瘤细胞会通过基因突变和表观遗传变化产生免疫抵抗表型，从而表现为免疫学上的沉默。而这，也意味着癌症治疗的进展将取决于癌细胞的生物学特性和宿主的免疫状态。丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpins）广泛参与体内多种生理过程，其中丝氨酸蛋白酶抑制剂B9（Sb9）是颗粒酶B（GrB）的生理抑制剂，被认为具有使肿瘤细胞免受凋亡的保护作用。即GrB被细胞毒性淋巴细胞（CL）传递至靶细胞后，可以激活caspases-3和caspases-8并触发凋亡，而Sb9可以抑制该过程。为了了解这种保护作用，来自美国哈佛医学院、哈佛大学干细胞研究所等机构的研究人员基于“在人类和小鼠的多种肿瘤（原发性黑色素瘤、乳腺癌和肺癌）中存在Sb9和GrB表达”的现象进行研究，最终发现Sb9的遗传消融使肿瘤不仅能够被CL衍生的GrB杀死，还能够被内源性产生的GrB杀死，从而共同控制了小鼠的癌症。该研究发表于《CELL》，题为《DirectTumorKillingandImmunotherapythroughAnti-SerpinB9Therapy》。Sb9使肿瘤免受GrB诱导的细胞凋亡Sb9可以通过经典的丝氨酸蛋白酶抑制剂机制抑制GrB，导致在黑色素瘤细胞（B6）中产生抗SDS的62kDaSb9-GrB复合物。而正常细胞中，Sb9主要表达47kDa的未结合单体。但实验结果显示，小鼠B6细胞中几乎所有的GrB都与Sb9形成62kDa的复合物。WesternblottingshowsthreeformsofSb9andGrBexpressioninB6cells.研究人员使用CRISPR/Cas9系统破坏Sb9基因后，发现敲除Sb9不仅没有影响B6细胞的增殖，反而增强了GrB的活性；且与B6野生型相比，GrB诱导的特异性凋亡也增加了2.3倍。Sb9IsRequiredtoProtectMelanomaTumorsfromGrB-InducedApoptosis.Sb9控制肿瘤的生长为了研究Sb9在体内肿瘤进展和转移中的作用，研究人员将野生型（WT）和敲除Sb9（B6-Sb9KO）的B6细胞分别注射到C57BL/6小鼠中。结果显示，在植入后第27天，B6-Sb9KO细胞的肿瘤比B6-WT组小4倍，且B6-Sb9KO肿瘤小鼠的生存时间（MST：半数生存期）比B6-WT肿瘤小鼠的MST（p0.）明显更长。Sb9ActsCellIntrinsicallytoControlTumorGrowthInVivo.随后，研究人员发现B6-WT和B6-Sb9KO中调节性T细胞（Tregs）、肿瘤相关巨噬细胞（TAMs,M和M2）和骨髓源性抑制细胞（MDSCs）的水平并无差异，但肿瘤引流淋巴结（TDLNs）中的黑色素瘤细胞水平降低了。这表明肿瘤Sb9的表达对TME中免疫抑制细胞的影响很小，但Sb9的缺失会减少肿瘤的转移。Thepopulationsofmelanomatumors,Treg,TAM,MDSCbetweentheB6-WTandB6-Sb9KOatday7post-implantation.进一步研究发现，敲除小鼠Sb9基因会导致黑素瘤肿瘤生长变慢，MST变长，且植入B6-Sb9KO肿瘤会导致肿瘤微环境中的效应CD8+T细胞与Treg、效应记忆CD8+T细胞与Treg等细胞的比例显著升高，并显著降低TAMs（p=0.）和MDSCs（p=0.）的水平。Sb9DeletionsRestoreHostImmunitytoTumorsandDisruptStromaintheTME.这意味着小鼠Sb9的缺失使Treg、TAM和MDSC暴露在TME内GrB介导的凋亡中，从而恢复了肿瘤免疫应答，并抑制肿瘤的发展。抑制Sb9将影响肿瘤的生长为了验证Sb9抑制对肿瘤的影响，研究人员对筛选出的小分子化合物（,3-苯并恶唑-6-羧酸）（一种能降低B6细胞Sb9-GrB复合物表达的小分子化合物）进行抗肿瘤活性实验。TreatmentwithaSmallMoleculeInhibitorofSb9SuppressesMelanomaProgressionInVivo.结果显示，化合物能显着缩小B6肿瘤，并降低免疫抑制性Treg、TAM和MDSC的水平；而该现象在B6-Sb9KO细胞和带有B6-Sb9KO肿瘤的Sb9KO小鼠中均不明显。总结总之，该研究揭示了新靶点Sb9及其抑制剂的多水平靶向肿瘤的作用机制，即通过增强GrB介导的肿瘤细胞凋亡，下调TME中免疫抑制细胞和消除血管和间质的生成，从而使TME不利于肿瘤的生长和转移；这意味着Sb9抑制剂可能成为肿瘤治疗的新方向。END关于试剂：APExBIO可大量提供用于化合物筛选、免疫荧光染色、细胞培养以及RT-PCR等实验的试剂（如化合物库、染料、酶等），欢迎大家前往APExBIO